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技術文章/ Technical Articles

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  • 2016

    5-9

    中文名:異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)英文名稱:Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside用途:異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用*的誘導劑,不被細菌代謝而十分穩定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG常用于需要誘導β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與X-Gal或Bluo-Gal結合使用,用于重組細菌菌落的藍白篩選,這些菌落可以誘導lac操縱子在大腸桿菌中的表達。IPTG與lacI阻遏蛋白結合并改變其構象而發揮作用,防止β-半乳糖苷...

  • 2016

    5-7

    一、原理植物激素(planthormone)免疫定量主要有放射免疫分析(RIA)和酶聯吸附免疫分析(ELISA),由于前者操作上欠安全等原因,目前常采用后一種類型。在ELISA中,抗原抗體反應的檢測依靠酶標記物來實現,常用的酶有辣根過氧化物酶和堿性磷酸酯酶。酶可直接標記激素分子,稱為酶標植物激素,也可標記于第二抗體(識別抗激素抗體Fc片段的抗體或金黃色葡萄球菌A蛋白),稱為酶標二抗。這兩類標記物分別用于固相抗體型和固相抗原型ELISA。A.固相抗體型ELISA:將抗激素的單克...

  • 2016

    5-4

    在細胞中,蛋白質并不是孤單的個體。大多數蛋白通過與分子伴侶或其他蛋白形成復合物而發揮其功能。因此,在了解細胞的生物學特性時,蛋白質相互作用(PPI)研究就成了重要一環。在藥物開發的過程中,這一信息也至關重要,有助于確認藥物靶點。一提起蛋白質相互作用研究,你的腦海中可能馬上浮現出:酵母雙雜交、免疫共沉淀等技術。的確,這些都是經典方法,可有效檢測體內體外蛋白質相互作用。然而,它們不能提供動態的蛋白相互作用信息,似乎還缺乏一些說服力?;诖?,共振能量轉移這種方法受到人們的青睞。這種...

  • 2016

    5-3

    痛風發作會在人體關節部位引發炎癥和劇烈疼痛,但過了一段時間后,炎癥通常會自動減弱,疼痛感也逐漸消失。這為何會發生?德國研究人員發現,原因在于一種人體免疫細胞的“自殺式攻擊”。痛風的病因是體內嘌呤物質新陳代謝紊亂,導致尿酸合成增加、排出減少,造成高尿酸血癥。血液中尿酸濃度過高時,尿酸會以微小的鈉鹽結晶(俗稱痛風石)形式析出,積累在關節、軟骨和腎臟中,引發炎癥。德國埃爾朗根大學近日發表研究公報稱,其研究人員發現,人體免疫系統的嗜中性粒細胞在抗擊痛風引發的炎癥中發揮了關鍵作用。實驗...

  • 2016

    5-2

    Dmem(A)細胞培養基(粉末型)成分序號化合物名稱含量(mg/L)序號化合物名稱含量(mg/L)1無水氯化鈣.2H2O265.0018L-絲氨酸42.002硝酸鐵.9H2O0.1019L-蘇氨酸95.003氯化鉀400.0020L-色氨酸16.004無水硫酸鎂97.6721L-酪氨酸72.005氯化鈉6400.0022L-纈氨酸94.006無水磷酸二氫鈉109.0023D-泛酸鈣4.007丁二酸75.0024酒石酸膽堿7.208丁二酸鈉100.0025葉酸4.009L-鹽酸...

  • 2016

    4-28

    Q:westernblot中脫脂奶粉封閉的是哪些蛋白?原理是什么?A:脫脂奶粉中主要是乳清蛋白和酪蛋白。原理就是用非抗原的蛋白去封閉膜,避免標記抗體固定在膜上引起背景增高。Q:請問封閉液和抗體稀釋液用BSA和脫脂奶粉有什么區別呢?有人跟我說奶粉的封閉效果更好些,但是通常只能用于WesterBlot,如果要做elisa或者phagedisplay時候,蛋白鋪板的話,不能使用脫脂奶粉??墒且灿腥苏f可以,請問是否有這個說法呢?A:所謂封閉是用以減少或消除載體上的非特異性結合蛋白的分...

  • 2016

    4-27

    考馬斯亮蘭G250與蛋白質結合,在0-1000ug/ml范圍內,于波長595nm處的吸光度與蛋白質含量成正比,可用于蛋白質含量的測定??捡R斯亮蘭G250與蛋白質結合迅速,結合產物在室溫下10分鐘內較為穩定,是一種較好的蛋白質定量測定方法。1.實驗部分1.1儀器與試劑:LabtechUVPOWER紫外分光光度計;玻璃比色皿一套;考馬斯亮藍G250;牛血清蛋白;超純水。1.2試液的制備:牛血清蛋白標準溶液(1000ug/ml)的制備稱取100mg牛血清蛋白置100ml容量瓶中,加...

  • 2016

    4-26

    (一)、儀器設備1)18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或醫用微波爐;2)水浴鍋(二)、試劑1)pbs緩沖液(pH7.2~7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO44.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L。2)0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液(CB,pH6.0,1000ml):檸檬酸三鈉3g,檸檬酸0.4g。3)0.5mol/LEDTA緩沖液(pH8.0):700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O,用10mmol/LNaOH調至pH...

  • 2016

    4-25

    三月二十日,來自中科院廣州生物醫藥與健康研究院、武漢菲沙基因信息有限公司(Frasergen)和加拿大西蒙佛雷澤大學的研究人員,在學術期刊《JournalofBioLogicalChemistry》發表學術論文,該研究檢測了iPSC生成及隨后基因校正過程中的基因組不穩定性,指出重編程和基因打靶可能會產生大量但卻不同的基因組變化,因此,在iPSC誘導時及基因打靶之后,必須進行嚴格的基因組監控和選擇。本文通訊作者是中科院生物醫藥與健康研究院研究員潘光錦博士,其2002年碩士畢業于...

  • 2016

    4-23

    關于293/293T細胞1、種屬都為人,不是鼠。2、來源:293細胞是轉染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復制起始點與啟動子區的質粒可以復制。用Ca3(PO4)2轉染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉染后2-3天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉染293T細胞是過表達蛋白并獲得細胞內及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。3、形態為上皮細胞,能致瘤。4、染色體核型:亞三倍體人細胞系。染色體眾...

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